我喜欢喝茶，尤其爱喝普洱茶。前段时间读到方舟子的一篇科普文章《喝茶能防癌还是致癌》，其中说到了普洱茶含有致癌物黄曲霉素，这篇文章引用了前几年的两篇科技论文：2010年广州市疾病预防控制中心研究人员抽查了广州市场上的70份普洱茶样品，发现全都能检测出黄曲霉素;2012年南昌大学一名学生从南昌市场采集了60份普洱茶，全都能检测出黄曲霉素，其中7份超标。一口气读完老方的这篇文章，我不禁心中有点发毛，转身泡了杯普洱茶，给自己压压惊!
普洱茶和肝癌是否相关
捧着茶杯，我开始思考，普洱茶如果真的像那两篇科技论文所说的含有多种真菌毒素且浓度大大超标的话，以黄曲霉素尤其是B1的毒性之大，喝茶这么一个生活方式足可以改写中国癌症的流行病学结果。流行病学知识告诉我，粮食中黄曲霉毒素污染率的高低与地区的肝癌死亡率呈正相关，而我国各省份中肝癌死亡率最低的是云南(普洱茶的产地)，从普洱茶-肝癌相关性上看，似乎不支持普洱茶致癌的假说。
老方文章中提出的问题还是很重要的，值得认真研究一番。除这两篇论文外，迄今已经发表的关于检测普洱茶真菌毒素的文章有很多，但研究结果不一致，有的说没有，有的说微量，有的说很多。从这些结果上推测，普洱茶中的黄曲霉菌可能来自于运输、储存中的污染，而不太会是发酵工艺中的必然产物，因为后者的污染将使检测结果趋于一致。如果不是发酵中带来的污染，理论上无论黑茶、红茶、甚至是绿茶、咖啡都有可能受到真菌毒素的污染。我快速上网查了下其他茶叶产品的情况，很快查到不同的茶叶产品以及咖啡中都检测出真菌毒素。其中有一篇文章(Emilia Ferrer et al。， Simultaneous determination of mycotoxin in commercial coffee， Food Control 2015 ， 57 ：282-292)报道：研究人员通过使用质谱法对西班牙超市中售卖的100种咖啡样本进行分析，测到多种真菌毒素，包括伏马菌素、黄曲霉毒素、单端孢霉烯和新兴真菌毒素(浓度范围为0.10 - 3.570μg /kg)。他们还发现有5个咖啡样本中赭曲霉毒素A超过当前的最大允许含量。
我做了几个假设，让实验室通过独立分析一批茶叶来给予证明。第一，普洱茶的制备工艺不产生黄曲霉素和其他真菌毒素，茶叶中含有的这几类真菌来自于后续运输和存储过程中的污染，所以我们同步检测普洱茶和其他如绿茶、红茶产品，应该会得到相类似的结果。有人做过普洱茶的渥堆模拟试验，将三组云南大叶种毛茶接种Aspergillusflavus(一种菌)，结果很有意思，对照组花生的黄曲霉毒素含量于第20天达最高峰(12，173μg/kg)，接种A。 flavus的毛茶中灭过菌的A组检出微量的黄曲霉毒素(1.05μg/kg)，含量低于卫生标准，而未灭菌的B组及未接菌种的C组未检出黄曲霉毒素。这个实验可能需要进一步重复，它的结果是否提示黄曲霉菌并不适合在普洱茶发酵的微生态中生长?第二，实验室污染问题，这可能是导致检测结果不一致的一个重要原因。既然茶叶中有微量真菌，那么为什么实验室中就不会有呢?常见寄生霉菌广泛存在于温度为25-40℃的温暖地区，因此位于热带地区或者常温条件下的实验室容易受到污染，现在的实验室采用三重四级杆串联质谱，这些高灵敏度的分析仪器会因为实验设备、材料、试剂等微量真菌污染而产生假阳性的结果。事实上我们实验室在采用三重四级杆质谱开始茶叶检测前的空白试验，都发现有真菌毒素，系统清洗并更换试剂后才去除这个因素。第三，检测方法的选择也很重要。我们是用开水泡茶，饮用的是茶汤，与玉米、花生等粮食相比在食用方法和用量上有着根本的差异，黄曲霉毒素是脂溶性的，但微溶于水，它溶解进入热水和有机溶剂的比例不一样，采用沸水提取法来模拟实际的饮茶方法(单次冲泡和多次冲泡茶叶取样)，应该能更准确地检测茶叶中进入茶汤的霉菌毒素，而有机溶剂萃取法更适合检测食品中的霉菌毒素的含量。
我们购买了来自中国大陆、中国台湾、印度、日本等地的20种市售茶叶，分别为：中国产普洱茶(帝泊洱、贡霖祥、糯香普洱、中茶普洱、LUPICIA PUER TEA、2009年普洱熟茶、2016年普洱生茶);中国产青茶(铁观音知福、铁观音私房茶、台湾东方美人);中国产红茶金骏眉;中国产绿茶(千丈白毫、西湖龙井);印度产红茶(LUPICIA MUSCAT、LUPICIA NILGIRI FOP、LUPICIA earl grey、English black tea);南非产红茶Vanilla bourbon tea;日本产绿茶(伊藤园绿茶、LUPICIA HOUJICHA)。采用有机溶剂(乙腈-2%甲酸水(1/1，V/V))以及80℃热水两种方法提取20种茶叶中的真菌毒素，利用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法进行分析测定及方法学考察，检测各茶叶中黄曲霉毒素(B1，B2，G1和G2)、伏马霉素(FB1、FB2、FB3)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的绝对含量。
我们发现采用有机溶剂提取的检测方法，包括普洱茶、红茶、绿茶在内的多种茶叶产品都不同程度检测到极微量的真菌毒素，其中黄曲霉毒素B2在6种茶叶产品中被检测到，黄曲霉毒素G1在4种茶叶中被检测到，伏马霉素FB1在3种茶叶中被检测到，伏马霉素FB2在一种茶叶中被检测到。其中毒性最强的黄曲霉毒素B1并未检测到。而80℃热水提取样本中，除在一种糯香普洱产品中检出微量的(0.15-3.33 ?μg/kg)伏马霉素B1和B2以外，其余所测样本中8种真菌毒素均未检出。
美国食品药品监督管理局以及中国国家标准GB2761《食品中真菌毒素限量》中规定食品、玉米、玉米制品、花生、花生制品中的黄曲霉素限量标准为20μg/kg;脱氧雪腐镰刀菌烯醇在玉米、玉米面、大麦、小麦中的限量为1，000μg /kg;伏马菌素欧盟限定标准为玉米和玉米制品中不得超过1，000μg/kg。我们实验室采用的两种提取方法检出的茶叶真菌毒素含量在0.15-7.41μg/kg之间，均未超过国际食品安全规定的真菌毒素限量。
总结一下，我们通过随机采样对20种市售茶叶的检测结果来看，有几个普洱茶产品含有包括黄曲霉毒素在内的真菌毒素，但低于限量标准，普洱茶产品所含的真菌毒素并不显著高于其他茶叶(红茶、绿茶等)产品。用热水法提取检测，在茶叶中所含的微量真菌毒素进入茶汤的量更少。
因为样本量的限制，这个检测结果并不能覆盖市场上其他的普洱茶产品。各种茶类饮品(因为农药、重金属、真菌代谢产物等潜在的毒素所构成)的安全性问题永远是一个大事，要从根本上解决这类问题，需要我们针对这些产品制定出一套科学、有效的卫生标准。有兴趣阅读我们的具体检测方法和结果的可以在网上下载文献，如文章中所说，我们希望这项工作能为今后茶叶产品制定包括真菌毒素指标在内的卫生标准提供一些前期的研究和技术基础。
